內鏡用無菌超聲耦合劑：樣品特性與核心檢測要點

一、 樣品介紹：無菌耦合劑的關鍵特性 (占比30%)

內鏡用無菌超聲耦合劑是一種專為內窺鏡超聲檢查（EUS）和超聲內鏡引導下的介入操作（如FNA）設計的醫療器械耗材。其核心作用在于充填內鏡超聲探頭與人體腔道（如消化道、支氣管）或靶組織之間的空隙，有效傳導超聲波信號，確保成像清晰度和介入操作的性。相較于體表用耦合劑，其在配方、無菌保障和生物相容性方面有極其嚴格的要求：

1. 無菌性： 這是核心的差異點。產品在終包裝內必須達到無菌狀態，并保證在有效期內維持無菌，以避免將微生物（細菌、真菌、孢子）引入人體無菌腔道或組織，引發嚴重感染。這是法規強制的首要要求。
2. 生物相容性： 成分需具備高度的生物相容性，確保在與黏膜、組織長時間接觸或可能少量滲入體內時，不引起毒性、刺激性、致敏性、遺傳毒性或植入反應。需通過標準化生物學評價試驗進行驗證。
3. 超聲傳導性能： 核心功能需求。需具有與水接近的聲阻抗和極低的聲衰減系數，以保證超聲波穿透，獲取高分辨率圖像。
4. 粘稠度與流變性： 需具備適宜的粘稠度（通常較高）和流變特性（如假塑性）。這要求在探頭移動時粘度降低易于涂抹，靜止時粘度恢復防止滴落，確保耦合劑的駐留性，避免在操作過程中因重力或腔道蠕動而流失，影響成像和操作。
5. 潤滑性與濕潤性： 良好的潤滑性可減少探頭在腔道內移動的阻力；優異的濕潤性確保能迅速鋪展在探頭和黏膜表面，形成均勻無氣泡的薄層。
6. 清澈透明： 便于術者觀察操作視野。
7. 成分安全性： 所有成分（水溶性高分子聚合物如卡波姆、羥乙基纖維素，保濕劑如甘油、丙二醇，純化水，以及必要的pH調節劑、螯合劑等）必須符合醫療器械級標準，不含已知致癌、致突變、致畸或有明顯毒性物質。嚴格限制內毒素含量。
8. 包裝完整性： 無菌屏障系統（如單劑量注射器、軟管、安瓿瓶）必須確保初始無菌并在運輸、儲存直至使用前維持無菌狀態。
9. 穩定性： 在規定的儲存條件下（溫度、濕度、避光）及有效期內，其物理化學性質（粘度、pH、外觀）、無菌狀態和生物相容性必須保持穩定。

二、 核心檢測項目與方法 (占比70%)

內鏡用無菌超聲耦合劑的質量控制體系極其嚴格，檢測貫穿研發、生產和放行全過程，以確保產品的安全有效。檢測主要分為物理化學性能、微生物學性能（無菌保障）、生物學評價三大類。

1. 物理化學性能檢測
* 外觀： 肉眼檢查樣品顏色、澄清度、均勻性，是否存在異物、顆粒、分層或凝膠破裂。
* pH值： 使用經校準的pH計測定。接近中性（通常6.5-7.5）對黏膜和組織刺激性小。需考慮產品稀釋（模擬使用條件）后的pH變化。
* 粘度：
* 旋轉粘度計法： 在指定剪切速率（常模擬涂抹和駐留狀態，如低剪切速率0.5-1 rpm，高剪切速率10-100 rpm）和溫度（如25℃, 37℃）下測量表觀粘度。評價假塑性和觸變性。
* 流變曲線： 繪制剪切應力-剪切速率曲線，全面表征流變行為（屈服應力、觸變環面積）。
* 聲學性能 (關鍵)：
* 聲速： 使用脈沖回波法或干涉法測量超聲波在耦合劑中的傳播速度（m/s）。
* 聲衰減系數： 測量超聲波強度隨傳播距離的衰減程度（dB/cm/MHz）。要求遠低于組織衰減（通常目標 <0.5 dB/cm/MHz @ 5MHz），確保信號穿透力。
* 聲阻抗： 計算得出（密度 * 聲速）。需與水或目標組織聲阻抗匹配（~1.5 MRayl），以大限度減少探頭-耦合劑和組織-耦合劑界面的超聲波反射損失。
* 密度： 比重瓶法或電子密度計測定，用于聲阻抗計算。
* 固體含量/水分： 烘箱法或卡氏水分測定法，監控批次間一致性。
* 裝量： 驗證單劑量包裝的實際容量是否符合標示量。
* 包裝完整性：
* 物理檢測： 目視檢查包裝密封性、無泄漏。
* 染色浸透法： 將密封包裝浸入染色液（如亞甲藍），施加負壓，檢查內部是否滲入染料。
* 高壓放電法（適用于特定塑料包裝）： 檢測微小針孔泄漏。
* 微生物挑戰法（包裝驗證的一部分）： 包裝后滅菌前，在驗證環境中浸染高濃度菌液，經滅菌后檢查無菌性是否被破壞。
* 穩定性試驗：
* 加速穩定性： 在高于推薦儲存溫度（如40℃, 50℃）下放置指定時間（如1, 2, 3, 6月），定期取樣檢測關鍵指標（外觀、pH、粘度、無菌、內毒素、生物學）。
* 實時穩定性： 在標稱儲存條件（如25℃/60%RH）下長期放置直至有效期后，檢測各項指標以確定實際有效期。

2. 微生物學性能檢測 (無菌保障核心)
* 無菌檢查：
* 方法： 嚴格遵守藥典（如中國藥典、USP、EP）無菌檢查法通則〈1101〉及相關附錄（如〈1227〉）要求。
* 培養基： 通常使用胰酪大豆胨液體培養基（TSB，用于需氧菌和真菌）和硫乙醇酸鹽流體培養基（FTM，用于需氧菌、厭氧菌）。必須進行培養基適用性檢查（促生長能力、無菌性、抑制能力）。
* 樣品處理： 直接接種法或薄膜過濾法。對于粘稠樣品，薄膜過濾法（結合適當稀釋或沖洗）是首選，以消除抑菌性干擾。
* 培養條件： TSB：20-25℃不少于14天； FTM：30-35℃不少于14天。
* 陽性對照： 必須同步進行，證明培養基支持生長。
* 陰性對照： 必須同步進行，證明試驗過程無菌操作有效。
* 結果判定： 所有測試管均澄清無菌生長，判為符合無菌要求。任一管出現渾濁生長，需按規程調查。
* 微生物限度檢查（非無菌產品要求，但對于滅菌前中間品/原材料監控很重要）：
* 需氧菌總數、霉菌和酵母菌總數計數： 胰酪大豆胨瓊脂培養基（TSA）傾注法或涂布法，沙氏葡萄糖瓊脂培養基（SDA）涂布法。
* 控制菌檢查： 如不得檢出金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、沙門菌、耐膽鹽革蘭陰性菌等特定致病菌。
* 方法適用性試驗： 正式測試前必須進行，確認樣品本身或其殘留物不影響微生物的回收。
* 細菌內毒素試驗：
* 方法： 首選凝膠法鱟試驗（LAL）。嚴格遵循藥典〈1143〉要求。
* 限度： 通常設定極嚴（如≤0.5 EU/mL），遠低于體表耦合劑（如≤20 EU/mL）。
* 干擾試驗： 正式測試前必須進行驗證（確認樣品在大有效稀釋倍數下對內毒素與鱟試劑的反應無抑制或增強作用）。
* 供試品陽性對照： 必須包含在測試中。
* 滅菌過程驗證： 對選定的滅菌方法（輻射滅菌如鈷60、電子束輻射，或環氧乙烷滅菌）進行嚴格驗證（安裝、操作、性能鑒定PQ），確保滅菌劑（輻射劑量/EO濃度）、溫濕度、時間等參數能穩定達到無菌保證水平（SAL ≤ 10??）。需使用生物指示劑（如耐輻射奇球菌孢子D10值測定）挑戰滅菌效果。

3. 生物學評價
* 依據標準： ISO 10993系列標準《醫療器械生物學評價》。
* 評價策略： 基于產品特性（與黏膜/組織接觸，可能接觸循環系統）、接觸性質和接觸時間（通常按≤24小時或持久接觸考量），進行必要的生物學試驗。
* 常規試驗（示例）：
* 細胞毒性試驗 (ISO 10993-5)： 浸提液接觸細胞（如L929小鼠成纖維細胞），評估細胞死亡或生長抑制情況（MTT法、瓊脂擴散法、直接接觸法）。必須無潛在細胞毒性。
* 皮膚致敏試驗 (ISO 10993-10)： 評估引發遲發型超敏反應的可能性（如局部淋巴結試驗LLNA或大化試驗GPMT）。目標為無致敏性。
* 皮內反應試驗 (ISO 10993-10)： 注射浸提液于動物皮內，評估局部炎癥反應（與陰性對照比較）。要求無顯著刺激。
* 急性全身毒性試驗 (ISO 10993-11)： 靜脈或腹腔注射浸提液，觀察動物全身反應。要求無毒性反應。
* 遺傳毒性試驗 (ISO 10993-3)： 如Ames試驗（基因突變），染色體畸變試驗等，評估潛在致癌致突變風險。必須為陰性。
* 溶血試驗 (ISO 10993-4)： 評估對紅細胞的破壞作用（溶血率要求<5%）。
* 熱原試驗 (可選，但通常被內毒素試驗替代)： 家兔法，評估浸提液引起的體溫升高情況。
* 浸提條件： 生物學試驗使用極性（生理鹽水）和非極性（棉籽油或特定溶劑如乙醇/丙酮）介質，在適宜溫度和時間（如37℃×24h, 70℃×24h, 50℃×72h）下制備浸提液，盡可能模擬臨床使用中的差情況。

結論

內鏡用無菌超聲耦合劑是一種高科技、高要求的醫療器械耗材。其核心價值在于保障內鏡超聲診療過程的安全性和有效性。嚴格的檢測體系是其質量的根本保障，其中無菌保障（無菌檢查、內毒素控制、滅菌驗證）是其區別于普通耦合劑的生命線，必須投入大的資源和關注。物理化學性能（尤其是聲學性能和流變性）直接影響臨床成像質量和操作順暢度。全面的生物學評價則是患者安全的重要防線。生產企業必須建立完善的質量管理體系，配備先進的檢測設備和的檢驗人員，嚴格遵循國內外法規和標準（如ISO、各國藥典、GB/YY標準），執行每一批產品的放行檢測和持續的穩定性監測，確保每一支到達臨床的內鏡用無菌耦合劑都安全、可靠、有效，為診療保駕護航。